NGS文库制备方案再升级，高效适配华大智造MGISP-960系统

发布时间： 2025-09-30 浏览量：0

随着高通量测序技术的飞速发展，NGS测序在生命科学基础研究与临床诊断检测领域的作用日益凸显。面对样本量持续增长的NGS检测需求，如何确保核酸纯化、NGS文库制备及上机测序数据产出的高效性、稳定性与便捷性，成为NGS领域研究人员及供应商面临的新挑战。TIANGEN秉承“质量为天、服务为根”的理念，不断优化样本前处理、核酸纯化及下游检测的相关产品，为科研与临床用户提供更高效、更稳定的解决方案。

TIANGEN近期推出了两款专为华大智造MGISP-960自动化建库系统设计的文库制备产品——TIANSeq通用型DNA文库构建试剂盒（Cat#NG111）与TIANSeq通用型RNA文库构建试剂盒（Cat#NR122），旨在全面满足DNAseq和RNAseq的自动化文库构建需求，为研究人员提供更加高效、稳定的实验选择。

TIANSeq通用型DNA文库构建试剂盒

一步法简化流程，提升效率

产品特点

◉ 一步法完成：

DNA片段化、末端修复及3'端dA尾添加在同一管内一步完成，无需中间纯化步骤，极大简化了实验流程。

◉ 高效兼容：

兼容illumina和MGI高通量测序平台，确保实验结果的广泛适用性。

◉ 高效转化率：

DNA样本起始量低至 1 ng，仍能保持高文库转化效率。

自动化与手工建库对比验证

实验结果一致性高

在MGISP-960平台上使用TIANSeq通用型DNA文库构建试剂盒 (Cat#NG111)，搭配TIANSeq 双索引接头 (MGI) (Cat#NG230)进行自动化建库，同时开展手工建库，通过文库得率、测序数据质控指标评价自动化建库和手工建库。本次DNA文库制备试剂测评的样本为NA12878和玉米基因组DNA，DNA文库制备的核酸起始量为100 ng，测评结论如下。

文库得率稳定

NA12878和玉米基因组DNA测试显示，自动化建库得率达手工的95%，单次12个文库浓度CV值<6%（如下表1）。

表1. NA12878和玉米基因组DNA文库制备得率结果分析

TIANSeq通用型DNA文库构建试剂盒（NA12878和玉米）基于MGISP-960的自动化及手工建库的文库产出。

图1. NA12878和玉米自动化和手工文库制备得率比较。

（左右滑动查看完整图表）

图2. Agilent2100 Bioanalyzer检测结果表明NA12878的自动化建库和手工建库的文库片段集中，峰型基本一致，大小相近。

自动化文库与手动文库

测序数据一致性

比对率≥99%，关键指标如Effective Rate、Q20、Q30自动化与手工建库的插入片段大小、GC含量等指标高度一致（如下表2）。

表2. NA12878和玉米测序数据质控分析数据

TIANSeq通用型RNA文库构建试剂盒

快速制备，兼顾低起始量文库制备

产品特点

◉ 快速一管式操作：

采用“一链合成+双链cDNA/末端修复/dA添加”一步法，无需纯化直接连接接头，大幅减少操作步骤。

◉ 低样本兼容性：

适用于10 ng-1 μg总RNA或低至100 pg的mRNA样本，满足不同实验需求。

RNA自动化与手工文库制备成库稳定

测序数据相关性好

本次RNA文库制备试剂测评的样本为人、香菇和斑马鱼，RNA文库制备的核酸起始量为100 ng，经过TIANSeq mRNA捕获磁珠（Cat#NR205）进行Poly A+ RNA捕获后的产物，使用TIANSeq通用型RNA文库构建试剂盒（Cat#NR122），搭配TIANSeq 双索引接头（MGI）（Cat#NG230）进行后续自动化和手工RNA测序文库制备，测试结论如下：

（1）使用TIANSeq通用型RNA文库构建试剂盒进行自动化建库与手工建库的文库得率稳定，均可满足后续上机测序要求。自动化RNA文库制备的得率可达手动文库制备的80%以上，单次12个自动化文库得率波动小于10%。详细信息如下表3所示。

表3.人、香菇和斑马鱼RNA文库制备得率结果